據上海勁馬業務員反映:經常有客戶來咨詢,為什么我的WB實驗中沒有得到目的蛋白條帶?通過長期和客戶探討實驗問題,我們發現出現白板的原因真的很多:蛋白提取的不好;樣品保存不當;處理條件不對;甚至有些WB操作問題等等……只要客戶耐心去尋找根源,一步步發現并解決它,我們終會發現,很多結果證明并非抗體本身的問題。今天上海勁馬小編特意整理一份關于這方面的解說,希望能幫助到您!
*聲明:此處僅代表CST抗體,并非市面所有。
一些小的改變可能會導致結果的巨大變化。做WB和IP的時候,一些抗體對實驗條件尤其敏感。我們建議客戶首先要確定以下幾個基本問題:
1.目的細胞是否表達這種蛋白?豐度如何?
2.提取蛋白的細胞裂解液是否加入了蛋白酶抑制劑?對于磷酸化蛋白是否還加入了磷酸酶抑制劑?防止蛋白降解。
3.是否按照CST建議的操作方法進行實驗?
4.刺激處理是否恰當?