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熒光定量PCR系列問題之無Ct值(信號)出現

2025年06月10日 13:35:45      來源:上海勁馬實驗設備有限公司 >> 進入該公司展臺      閱讀量:2

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熒光定量PCR系列問題之無Ct值(信號)出現有以下幾種可能原因及解決方法解析:歡迎閱讀參考。    
反應循環數不夠    
一般都要在35個循環以上,可根據實驗情況增加循環(如至45循環), 但高于45個循環會增加過多的背景信號
檢測熒光信號的步驟有誤    
一般SG法采用72℃延伸時采集,Taqman法則一般在退火結束時或延伸結束采集信號
引物或探針降解    
可通過PAGE電泳檢測其完整性
模板量不足    
對未知濃度的樣品應從系列稀釋樣本的zui高濃度做起
模板降解    
避免樣品制備中雜質的引入及反復凍融的情況發生
目的基因在組織中不表達或者表達量低    
嘗試其它組織

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