western 和ELISA 處理樣本有何差別?
根據上海勁馬生物實驗分析,將western和Elisa處理樣本卻別比對出來,分析給客戶。歡迎閱讀參考!
Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液(含有蛋白酶抑制劑),然后冰上研磨,收集于EP管,冰上裂解30min,4度12000rpm離心15min,取上清分裝,即得到蛋白樣品。建議直接電泳,多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量,一次性用完一支,避免反復凍融。
ELISA樣品,直接腦組織冰上勻漿,收集于EP管,同上一樣離心,大約220-250ul每支分裝(因為ELISA上樣量基本都是每孔100ul,做復孔,每個樣品2孔,就需要200ul,為了避免不夠2孔,分裝時要大于200ul每支),直接實驗。多余的-80保存,一樣避免反復凍融。
不過ELISA少量樣品進行預實驗,或者查閱文獻,看看大概組織里有多高濃度,選擇合適的試劑盒,測量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過高測量不準,或者濃度過低,小于試劑盒zui低可測濃度。
上海勁馬生物提醒廣大客戶群體:買Elisa試劑盒時,盡量先查文獻,通過文獻找品牌,再找供應商,找供應商就找正規代理商,千萬不要去干“賠夫人又折兵"的蠢事。
截止2015年2月底,引用上海勁馬生物ELISA試劑盒的SCI文章總數突破1030篇,并且還在以15篇/月的速度遞增,有的更是發表在