1. 首先，觀察細胞培養瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象。
2. 用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量叢瓶壁脫落;先不要打開培養瓶蓋,將細胞置于細胞培養箱內趨置培養2-4小時，以便穩定細胞狀態。
3. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后，取出細胞培養瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態;建議細胞傳代培養后，定期拍照、記錄細胞生長狀態。
5. 貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%，可正常傳代;若未超過80%，移除細胞培養瓶內培養基,預留5m左右繼續培養，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6. 懸浮細胞:將細胞培養瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離 心5min,離心后上清培養基可收集備用，管底細胞沉淀加入5m培養基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養瓶內培養,補加培養基至5ml;若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續培養,直至細胞密，度達80%左右時再進行傳代操作。
溫馨提醒:
可將培養瓶內多余的培養基轉移至50ml無菌離心管中備用;細胞*傳代時，可以將該培養基按照一定比例和客自備的培養基混合使用，讓細胞逐漸適應培養條件。確認細胞狀態良好后，應及時將部分細胞凍存，再進行后續的實驗，避免后期實驗失誤可能發生細胞污染或死亡而導致的細胞丟失，影響后續實驗。
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