科研朋友們，您在做實驗時是否遇到過ELISA吸光值一直在衰減這樣的現象呢？昨天上海勁馬業務員就收到貴陽醫學院的王老師前來咨詢的一個問題：加完顯色液(購買)顯色一定時間后，再加終止液（2M H2SO4，自己配制）后，立即測試其吸光度值，等過幾分鐘再測試吸光度值，發現兩次測得的吸光度值發生衰減。第二次均小于次。并且，加終止液時，從條加到第12條后，測試發現，吸光度值從1-12條逐級衰減。前提是這12條酶標板都是同一種產品，并且包被相同蛋白，我該怎么辦？經過我公司技術專員的分析，原來ELISA吸光度值衰減是可以這樣巧妙應對的。
其實具體的原因也很簡單，有可能是顯色液的質量不夠好。一般情況下，終止反應后OD值的下降前期不是很明顯。終止后，吸光度值是會隨著時間衰減，所以一般是加完終止液后立即測，這樣比較準。再次分析12條顯示逐級遞減的原因看看是否是：
① 顯色時間調整，如果您現在的顯色時間是10MIN，那調整到30MIN，再加終止液,觀察上述現象是否出現。
② 終止液中加入少量甘油看下怎么樣。建議您使用RD品牌的ELISA試劑盒，顯色時間是30分鐘，終止后要求在30分鐘內檢測，加入終止液后，在加入終止液后2到3分終內檢測，這是OD值相對比較高。擬合值能達到四個9。
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