一抗和二抗濃度和孵育時間比對
一抗和二抗在實驗中濃度及孵育時間有所改變,請按產品說明書上提示時間操作,本章小編為您具體解析一抗和二抗濃度和孵育時間比對,歡迎參考學習!
一抗孵育條件在免疫組化反應中zui重要,包括孵育時間、溫度和抗體濃度。一抗孵育溫度有幾種:4℃、室溫、37℃,其中4℃效果佳;孵育時間:這與溫度、抗體濃度有關,一般37℃1-2h,而4℃過夜和從冰箱拿出后37℃復溫45min。具體條件還要摸索。
二抗孵育條件:二抗一般室溫或37℃30min-1h,具體時間需要摸索,而濃度一般有工作液,若是濃縮液還要摸索濃度。但在免疫組化中我們一般先把二抗濃度和孵育時間先定下,然后去摸索一抗濃度和孵育時間。建議一抗反應在4℃佳,反應溫和,但時間超過16~24h。
抗體無論是保存還是運輸都應盡可能地避免反復凍融,收到抗體后請根據實驗的需要,對抗體進行分裝,避免同一管抗體反復凍融(反復凍融會導致抗體空間結構變 性,導致多聚體形成,從而降低抗體的結合能力)。抗體保存得當與否,直接決定了抗體的活性和使用效果,如果抗體保存得當,抗體活性大部分都可以維持數年。 請謹記,無論何時請按照說明書推薦的保存條件正確處理和保存抗體。