復旦大學劉贏同學我司如何提取和鑒定人血清氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)自身抗體。由于自己購買的抗體不知道如何鑒別,想請貴司技術給指導下具體步驟。我司技術根據劉同學的實驗操作,為其提供了以下方法解析:
方法 采用溴化氰活化的Sepharose 4B交聯Ox-LDL制備免疫吸附層析柱,從正常人血清中提取抗Ox-LDL自身抗體,采用ELISA法鑒定其免疫反應性,散射免疫比濁法分析自身抗體種類。
收集結果 用NaHCO3、醋酸鹽和KCNS溶液洗脫,分別收集洗脫峰。8份正常人血清中均收集到Ox-LDL自身抗體,與Ox-LDL均具有良好的反應性。自身抗體種類中以IgG為主,其次為IgM。
結論 此法提取的抗Ox-LDL自身抗體同Ox-LDL具有良好的反應能力。
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